在高效液相色譜(HPLC)、質(zhì)譜分析或無菌制劑制備等實驗中,針式過濾器被廣泛用于樣品澄清與除菌。然而,許多實驗人員常遇到“過濾后溶液中出現(xiàn)大量微小氣泡”的問題,不僅干擾儀器基線穩(wěn)定性,還可能影響定量準確性甚至堵塞色譜柱。這一現(xiàn)象看似微小,實則涉及多個操作與材料因素。
主要原因如下:
濾膜未充分潤濕:疏水性濾膜(如PTFE)若直接用于水相溶液,因表面張力高難以被潤濕,空氣被困在膜孔中,隨液體擠出形成氣泡。
過濾速度過快:用力推注器過猛導(dǎo)致液體高速通過濾膜,卷入空氣或使溶解氣體析出。
樣品本身含氣:超聲脫氣不充分的流動相或剛配制的緩沖液中含有溶解空氣,在減壓過濾過程中釋放。
濾器結(jié)構(gòu)設(shè)計缺陷:部分低價針式過濾器內(nèi)部存在死體積或密封不良,易殘留空氣。
有效解決方法:
預(yù)潤濕濾膜:對于水相樣品,先用少量甲醇、乙醇或異丙醇潤濕疏水膜(如PTFE),再切換為水相;親水膜(如尼龍、MCE)也建議用樣品預(yù)潤濕10–15秒。
控制推注力度:緩慢、勻速推動注射器,避免突然加壓??刹捎脦毫φ{(diào)節(jié)的過濾裝置輔助。
樣品預(yù)先脫氣:過濾前對樣品進行超聲處理5–10分鐘,或使用在線脫氣機處理流動相。
選擇優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:選用低死體積、一體化密封設(shè)計的針式過濾器,減少空氣滯留空間。
排氣操作:安裝過濾器后,先輕推少量液體排出前端空氣,再正式過濾主樣。
值得注意的是,某些應(yīng)用(如LC-MS)對氣泡極為敏感,建議在過濾后靜置片刻或再次短暫離心去除殘余氣泡。
通過規(guī)范操作與合理選材,針式過濾器的氣泡問題可以有效規(guī)避,確保分析數(shù)據(jù)的可靠性與實驗重復(fù)性。